Система проточного цитофлуориметра с микроскопией высокого разрешения в потоке с системой проточной микроскопии с функцией статистического количественного анализа изображений клеток Amnis ImageStream (Luminex Corporation, США) , год выпуска 2016, год модернизации 2020.

Используемое научное оборудование: Проточный цитометр с визуализацией Amnis ImageStreamX Mk II

Перечень услуг — Проточная цитометрия с визуализацией отдельных объектов

1. Получение изображений отдельных флуоресцентных объектов в потоке жидкости.

2. Получение светлопольных изображений объектов в потоке жидкости.

3. Анализ выживаемости культур клеток.

4. Определение размеров, формы флуоресцентно окрашенных объектов.

5. Анализ отдельных субпопуляций объектов с помощью флуоресцентной визуализации.

6. Анализ взаимодействия объектов между собой (например, интернализации объектов живыми клетками).

Перечень методик выполнения измерений

1. Методика получения изображений микрообъектов методом проточной цитометрии с визуализацией.

2. Методика анализа морфологии и размера объектов в потоке жидкости.

3. Методика выделения отдельных субпопуляций объектов по различным признакам

4. Методика анализа взаимного положения объектов на изображении (определения таких явлений, как интернализация объектов живыми клетками).

5. Методика анализа выживаемости культур клеток.

6. Методика изучения стадии клеточного цикла.

Краткое описание прибора

Флуоресцентный проточный цитометр с визуализацией для широкого круга исследовательских задач и изучения живых объектов в потоке жидкости.

Проточный цитометр с визуализацией ImageStream®X MarkII и FlowSight® использует комбинацию методов оптической микроскопии и проточной цитометрии, обеспечивая одновременный флуоресцентный анализ клеток в потоке с возможностью визуализации каждой клетки, включая параметры светорассеяния, микроскопию светлого и темного поля и до 10 флуоресцентных параметров.

Спецификация

Оптическое увеличение 40X

Числовая апертура 0.75

Размер пикселя 0.5 x 0.5 мкм

Поле зрения 60 x 128 мкм

Скорость записи 2,000 клеток/сек

Объем образца – 20-200 мкл

Использование образца – до 95%

Длины волн лазеров для измерения флуоресценции - 405 нм, 488 нм, 561 нм, 642 нм.

Измерение бокового светорассеяния – на длине волны 785 нм.

Расширенное описание прибора

Революционный проточный цитометр ImageStream®X Mk II Imaging сочетает в себе скорость, чувствительность и фенотипические возможности проточной цитометрии с подробными изображениями и функциональными возможностями микроскопии. Эта уникальная комбинация позволяет использовать широкий спектр приложений, которые ранее были невозможны.

Система ImageStreamX Mk II - это настольный мультиспектральный проточный цитометр, предназначенный для получения 1-12 каналов клеточных изображений. Собирая большое количество цифровых изображений на образец и обеспечивая численное представление характеристик на основе изображений, ImageStreamX Mk II объединяет информационное содержание каждой клетки, предоставляемое стандартной микроскопией, со статистической значимостью, обеспечиваемой большими размерами образцов, обычными для стандартной проточной цитометрии. Система ImageStreamX Mk II позволяет измерять интенсивность флуоресценции, как в обычном проточном цитометре; тем не менее, лучшие приложения для ImageStreamX Mk II используют возможности системы визуализации для определения местоположения и количественной оценки распределения сигналов внутри или между клетками.

Особенности системы ImageStreamX Mk II:

1) Быстрота: анализирует тысячи клеток в секунду

Проточный цитометр ImageStreamX Mk II Imaging может анализировать до 5000 клеток / сек с компенсацией интенсивности в реальном времени - идеально для анализа клеток в низкой концентрации.

2) Простота использования: адаптированный пользовательский интерфейс

Интуитивно понятный пользовательский интерфейс обеспечивает построение графиков и графическое стробирование в реальном времени, а также изображения каждой клетки. Простой в использовании «мастер компенсации» быстро поможет вам настроить многоцветные матрицы компенсации.

3) Гибкость: подходит для вашего образца, ваших целей, ваших флуорофоров

Проточный цитометр ImageStreamX II Imaging принимает до 6 лазеров и работает с пробами объемом 20–200 мкл для дополнительной экспериментальной гибкости - идеально подходит для многопользовательских лабораторий.

4) Эффективность: меньший объем пробы, меньшее количество отходов

Гидравлические системы, обеспечивающие использование проб до 95%, когда требуется каждая клетка. Восстановите неиспользованный образец для дальнейшего анализа, если требуются ортогональные методы.

5) Возможность адаптации: любое обновление, в любое время

Модульная конструкция проточного цитометра ImageStreamX Mk II Imaging позволяет системе расти вместе с вашими исследовательскими потребностями и бюджетом за счет широкого набора опций, устанавливаемых на месте. Большинство опций, включая дополнительные лазеры, могут быть установлены на заводе или обновлены в полевых условиях сертифицированным Luminex обслуживающим персоналом.

«Карусель» лазеров

Система состоит из 4 лазеров, которые полностью закрывают видимую область спектра.

1) 488 нм (диапазон мощности 400 мВт) стандартный лазер,

2) 400-413 нм (диапазон мощности: 140-160 мВт; возбуждаемые каналы: 457/45 нм; 537/65 нм; 582/25 нм; 610/30 нм; 702/85 нм; 762/35 нм),

3) 558-562 нм (диапазон мощности: 190-210 мВт; возбуждаемые каналы: 577/35 нм; 610/30 нм; 702/85 нм; 762/35 нм),

4) 635-647 нм (диапазон мощности: 140-160 мВт; возбуждаемые каналы: 702/85 нм; 762/35 нм).

Красители под эти лазеры можно выбрать в том числе из этой таблицы:

Также производитель представляет возможность выбрать материалы для исследований для указанных лазеров по ссылке (Optimize Your Fluorophore Selection) https://www.luminexcorp.com/imagestreamx-mk-ii/#training-support

Проточная цитометрия с функцией визуализации в потоке — это новое направление, сочетающее в себе не только возможности математического и статистического анализа клеток, но и микроскопию высокого разрешения каждой анализируемой клетки в потоке. Все услуги возможности произвести в 1-12 каналах на 4 видах лазеров.

Программное обеспечение позволяет с наисвышей точностью обработать флуоресцентный сигнал, а также светорассеяние от изучаемых объектов. Получаемый результат представляется в виде графиков, которые возможно отстроить под нужды потребителя, с высоким уровнем наглядности.

Измерение флуоресценции производится с помощью 12 каналов на 4 лазерах (488, 400-413, 558-562, 635-647 нм).

Сотрудники помогут в подборе красителей, разработке протокола исследований, подготовительных работах. Помогут проанализировать полученные результаты для дальнейшего их опубликования.

https://www.luminexcorp.com/imagestreamx-mk-ii/#overview

Список статей

2021

10.1016/j.jconrel.2020.11.051

10.1364/BOE.413845

2020

10.1007/s10895-020-02611-1

10.1134/S0030400X20060235

10.21883/OS.2020.06.49413.26-20